今天我們?yōu)榇蠹医榻B一下光學(xué)顯微鏡的基礎知識科普。
光的傳播
1、反射
光在傳播到不同物質(zhì)時(shí)，在分界面上改變傳播方向又返回原來(lái)物質(zhì)中的現象叫做光的反射。反射光線(xiàn)與入射光線(xiàn)、法線(xiàn)在同一平面上；反射光線(xiàn)和入射光線(xiàn)分居在法線(xiàn)的兩側；反射角等于入射角 。光具有可逆性。光的反射現象中，光路上是可逆的。
2、折射
光從一種透明介質(zhì)斜射入另一種透明介質(zhì)時(shí)，傳播方向一般會(huì )發(fā)生變化，這種現象叫光的折射。反射光光速與入射光相同 ，折射光光速與入射光不同。
3、干涉
干涉是兩列或兩列以上的波在空間中重疊時(shí)發(fā)生疊加從而形成新的波形的現象。
兩列頻率相同的光波在空中相遇時(shí)發(fā)生疊加，在某些區域總加強，在另外一些區域總減弱，出現明暗相間的條紋或者是彩色條紋的現象叫做光的干涉。
只有兩列光波的頻率相同，位相差恒定，振動(dòng)方向一致的相干光源才能產(chǎn)生光的干涉。
4、衍射
光在傳播過(guò)程中遇到障礙物或小孔時(shí)，光將偏離直線(xiàn)傳播的路徑而繞到障礙物后面傳播。小孔或障礙物的尺寸和光波的波長(cháng)差不多或者比波長(cháng)小時(shí)，光才能發(fā)生明顯的衍射現象。
顯微成像方式
1、明場(chǎng)
成像過(guò)程中靠透射光直接成像。在明場(chǎng)中，背景為亮，目標為暗。
2、暗場(chǎng)
在顯微鏡的觀(guān)察方式中，暗場(chǎng)與明場(chǎng)相對應，是光線(xiàn)傾斜照射到樣品的表面。
暗視場(chǎng)照明無(wú)論在光程布置上，照明效果上都與明視場(chǎng)照明有顯著(zhù)的差別。
除去觀(guān)測物體以外的光線(xiàn)或電子進(jìn)入物鏡，使目鏡中觀(guān)測到的視野背景是黑的，只有物體的邊緣是亮的。
利用這個(gè)方法能見(jiàn)到小至 4~200nm的微粒子，分辨率可比普通顯微法高50倍。
3、偏光
偏光顯微鏡用于研究透明與不透明各向異性材料，在地質(zhì)學(xué)等理工科專(zhuān)業(yè)中有重要應用。
具有雙折射的物質(zhì)，偏光顯微鏡都能分辨清楚。
4、熒光
熒光顯微鏡以紫外線(xiàn)為光源，照射被檢物體，使其發(fā)出熒光，然后在顯微鏡下觀(guān)察物體的形狀及其所在位置。
5、相襯
用于觀(guān)察未染色標本的顯微鏡?；罴毎臀慈旧纳飿吮疽蚣毎鞑考毼⒔Y構的折射率和厚度的不同，光波通過(guò)時(shí)波長(cháng)和振幅并不發(fā)生變化，僅相位發(fā)生變化（x相位差），這種相位差人眼無(wú)法觀(guān)察。
相差顯微鏡通過(guò)改變相位差，利用光的干涉和衍射現象，把相差變?yōu)檎穹顏?lái)觀(guān)察活細胞和未染色的標本。
相差顯微鏡用環(huán)狀光闌代替可變光闌， 用帶相板的物鏡代替普通物鏡，并帶有一個(gè)合軸用的望遠鏡，和普通顯微鏡有著(zhù)明顯區別。
6、微分干涉
微光干涉利用兩束光線(xiàn)通過(guò)光學(xué)系統中相位的變化發(fā)生相互干涉從而增強樣品反差，實(shí)現對非染色活細胞觀(guān)察。 微分干涉顯微鏡適于研究活細胞中較大的細胞器。
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