熒光圖像的記錄方法

【明美光電】一般染色之標本，應立即觀(guān)察，因當時(shí)熒光最顯著(zhù)；若不能馬上觀(guān)察，須儲存于干燥盒(Polyethylene Bag) 內，有時(shí)在0～5℃ 儲存，可保存一個(gè)月左右，仍可呈現特異熒光。

在熒光顯微鏡之紫外線(xiàn)照射下，染出之特異性熒光會(huì )很快消失，故要照相存證者，須于材料新鮮時(shí)染色，并馬上照相，才會(huì )有好效果。若使用自動(dòng)相機拍照，則底片以Kodacolo r(ASA 100) film 為宜，儀器則設定為ASA 400，照完后送洗時(shí)應指定以ASA 400 沖洗。以此相片再使用適當之正片底片(Kodak#5072) 照相，此時(shí)應改變不同曝光時(shí)間的長(cháng)短而選最好的片子。

熒光顯微鏡所看到的熒光圖像,一是具有形態(tài)學(xué)特征,二是具有熒光的顏色和亮度,在判斷結果時(shí),必須將二者結合起來(lái)綜合判斷。結果記錄根據主觀(guān)指標,即憑工作者目力觀(guān)察。

作為一般定性觀(guān)察,基本上可靠的。隨著(zhù)技術(shù)科學(xué)的發(fā)展,在不同程度上采用客觀(guān)指標記錄判斷結果,如用細胞分光光度計,圖像分析儀等儀器。但這些儀器記錄的結果,也必須結合主觀(guān)的判斷。

熒光顯微鏡攝影技術(shù)對于記錄熒光圖像十分必要,由于熒光很易褪色減弱,要即時(shí)攝影記錄結果。方法與普通顯微攝影技術(shù)基本相同。只是需要采用高速感光膠片如ASA200以上或24以上。因紫外光對熒光猝滅作用大,如FITC的標記物,在紫外光下照射30s,熒光亮度降低50%。所以,曝光速度太慢,就不能將熒光圖像拍攝下來(lái)。

一般研究型熒光顯微鏡都有半自動(dòng)或全自動(dòng)顯微攝影系統裝置CCD顯微鏡攝像頭或CMOS顯微鏡攝像頭。